elisa具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優點，被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定，為輔助臨床診斷與生物科研起到了積極的推動作用。但elisa測定中影響因素較多，操作過程中每個環節都會對試驗結果產生影響，出現錯誤的結果。

　　試劑的選擇：試劑的選擇是保證血液檢測質量的關鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對elisa試劑嚴格把關，但不同的試劑在使用效果上仍存在在差異。要選購度相對高、具有“三證”的試劑，不要用無批號的試劑，選用與儀器配套的試劑。更不要使用過期的試劑和混用不同批號的試劑。

　　試劑的準備：在臨床實驗室，對試劑的準備一般不太注意，通常的做法是在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面時間不夠的問題，其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現假陰性。因此，在elisa測定中試劑的準備為關鍵的是，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

　　抗原與抗體、抗體與酶標抗體反應一般在37℃2h～3h達到高峰。時間太短,敏感性下降,時間太長,吸附的抗原或復合物(在這個溫度下)可能脫落。酶底物反應時間的確定：一般采用15min～30min～45min。也可以標準陽性血清為準,隨時測定其OD值,當達到規定的OD值時,即終止反應。