大鼠骨橋素（OPN）ELISA試劑盒詳細介紹：  

[規格]：48T/96T  

品牌：瑞番  

[檢測波長]：450nm  

[保存條件]：2-8°，六個月  

[產品用途]：僅供科研使用  

[檢測目的]：用于測定血清，血漿，胸腹水等相關液體標本  

[特點]：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便  

瑞番供應的種屬有：人，雞，鴨，魚，馬，兔豬，植物等ELISA試劑盒等等  

大鼠骨橋素（OPN）ELISA試劑盒標本處理:  

1.本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。  

2.實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。  

3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。  

4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。  

5.若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。  

6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。  

7.建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。  

操作步驟：  

1、加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。  

2、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。  

4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。  

5、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。  

6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。  

7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。  

8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。  

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問題解答：  

若實驗效果不好，請及時對顯色結果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料：