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選購ELISA試劑盒要考慮這四個因素
2022-04-11
隨著科學技術和新興工業的發展,ELISA試劑盒對化學試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴格和專門化。ELISA試劑盒選擇十分重要了,主要參考以下四個方面:一、檢測方式如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。這種酶促反應具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標...
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ELISA試劑盒的包被與封閉有哪些不同?
2022-02-23
包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應根據試驗的特點和材料的性質而選定??贵w和蛋白質抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA試劑盒板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為100ng/ml-2...
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使用白介素ELISA試劑盒要注意這些細節
2022-02-22
白介素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法作為測定的方法時,試劑盒的組成一般包括:已包被單抗的酶標板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開后有干燥劑,實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。今天我們主要介紹其測定原理。現在白介素ELISA檢測試劑盒除非是測定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數用的是增強的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統,還有少數的指標可能使用競爭法,這類方法適用于半抗原的測定。具有復雜結構...
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ELISA試劑盒溫育常用的溫度有哪些?
2021-12-29
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。ELISA試劑盒溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結...
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ELISA試劑盒的選擇要考慮這幾個因素
2021-12-27
目前ELISA試劑盒在實驗室已經相當普及,絕大多數ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用商業化試劑盒當然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實驗更便利,往往還更加?,F在市面上的ELISA試劑盒既有國產品牌也有進口品牌,數量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出適用的產品呢?1.試劑盒特異性ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分--抗體對有關,若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時,先閱讀相關產品的說明書,了解試劑...
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影響ELISA測試結果的幾個因素分析
2021-11-26
ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數據進行統計分析后確定的,其確定依據為判斷結果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內之外的測定結果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區”。“灰區”的大小可用統計學方法確定。測定結果處于“灰區”的樣本,可通過確認試驗或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。目前各種形式的ELISA自動分析儀已經進入市場,如廣泛應用于血站系統的微板式全自動酶免分析儀...
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說說洗滌在ELISA試劑盒過程中的作用
2021-11-16
在進行酶聯免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)實驗中,有很多需要注意的地方,由于ELISA方法廣泛應用在各種抗原和抗體的此定中。但是測定中的影響因素很多,并且對操作有較高的要求,所以,在實驗中除了正常的相互反應,還會出現錯誤的反應,導致錯誤的結果。洗滌在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結...
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組織蛋白酶V(CTSV)酶聯免疫吸附測定試劑盒
2021-10-26
檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被組織蛋白酶V(CTSV)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組織蛋白酶V(CTSV)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血...
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